Pregătirea probei șiÎncărcare
Datorită utilizării unui sistem tampon continuu fără gel de stivuire în majoritatea cazurilor, probele ar trebui să aibă o concentrație adecvată și un volum mic. Folosiți apipetăsă se adauge încet proba, cu 5-10 μg per godeu, pentru a evita o scădere semnificativă a rezoluției. Cândîncărcarea probei, sursa de alimentare trebuie oprită. Proba trebuie să conțină un colorant indicator (0,025% albastru bromofenol sau portocaliu) și zaharoză (10-15%) sau glicerol (5-10%) pentru a-și crește densitatea, a concentra proba și a preveni difuzia. Cu toate acestea, uneori, zaharoza sau glicerolul pot provoca benzi în formă de U în rezultatele electroforezei, care pot fi evitate prin utilizarea 2,5% Ficoll (polivinilpirolidonă).
Electroforeză
Tensiunea pentru electroforeză este de 5-15 V/cm, în general în jur de 10 V/cm. Pentru separarea moleculelor mari, tensiunea ar trebui să fie mai mică, de obicei nu depășind 5 V/cm.
Colorarea
Colorantul fluorescent bromura de etidio (EB) este utilizat în mod obișnuit pentru colorare pentru a observa benzile de ADN în gel de agaroză. EB se poate insera între perechile de baze de molecule de ADN, determinând legarea EB de ADN. Absorbția luminii ultraviolete de 260 nm de către ADN este transferată către EB, iar EB legat emite fluorescență la 590 nm în regiunea roșu-portocalie a spectrului luminii vizibile. Colorarea gelului într-o soluție de MgSO4 de 1 mmol/L timp de 1 oră poate reduce fluorescența de fond cauzată de EB nelegat, facilitând detectarea unor cantități mici de ADN.
Colorantul EB are mai multe avantaje: este ușor de utilizat, nu sparge acizii nucleici, are sensibilitate ridicată și poate colora atât ADN-ul, cât și ARN-ul. EB poate fi adăugat la probă și urmărit folosind absorbția UV în orice moment. După colorare, EB poate fi îndepărtat prin extracție cu n-butanol.
Cu toate acestea, colorantul EB este un mutagen puternic și trebuie luate măsuri de precauție, cum ar fi purtarea mănușilor de polietilenă, în timpul manipulării. Acridina portocalie este, de asemenea, un colorant utilizat în mod obișnuit, deoarece poate diferenția între acizii nucleici monocatenari și dublu catenari (ADN, ARN). Prezintă fluorescență verde (530 nm) pentru acizii nucleici dublu catenar și fluorescență roșie (640 nm) pentru acizii nucleici monocatenar. În plus, pentru colorare pot fi utilizați și alți coloranți, cum ar fi albastru de metilen, verde de metilen și chinolina B.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) s-a specializat în producția de instrumente de electroforeză de mai bine de 50 de ani, cu propria noastră echipă tehnică profesionistă și centru de cercetare și dezvoltare. Avem o linie de producție fiabilă și completă, de la proiectare la inspecție și depozit, precum și suport de marketing. Produsele noastre principale sunt celula de electroforeză (rezervor/camera), sursa de alimentare cu electroforeză, transiluminator cu LED albastru, transiluminator UV, sistem de analiză și imagine cu gel etc.
Acum căutăm parteneri, atât rezervorul de electroforeză OEM, cât și distribuitorii sunt bineveniți.
Dacă aveți vreun plan de achiziție pentru produsele noastre, vă rugăm să nu ezitați să ne contactați. Ne puteți trimite mesaj pe e-mail[email protected]sau[email protected], sau vă rugăm să ne sunați la +86 15810650221 sau adăugați Whatsapp +86 15810650221 sau Wechat: 15810650221.
Vă rugăm să scanați codul QR pentru a-l adăuga pe Whatsapp sau WeChat.
Ora postării: 20-dec-2023