Electroforeza pe gel ADN este o tehnică comună de biologie moleculară utilizată pentru separarea și analiza fragmentelor de ADN pe baza dimensiunilor acestora. Procesul implică încărcarea fragmentelor de ADN de dimensiuni diferite pe un gel format din agaroză, un carbohidrat care se găsește în algele roșii.
Pregătirea și turnarea gelului de agaroză
- Se dizolvă agaroza într-o cantitate adecvată de tampon de electroforeză. Concentrația gelului este determinată de raportul masă-volum, cum ar fi 1 g de agaroză în 100ml de tampon pentru un gel 1%.
- Se încălzește amestecul într-un cuptor cu microunde, rotind recipientul pentru a asigura dizolvarea completă a agarozei.
- Se adaugă bromură de etidio la soluția de gel până la o concentrație finală de 0,5mg/ ml. Bromura de etidio se intercalează între perechile de baze ADN adiacente și emite fluorescență portocalie sub lumina UV. Rețineți că bromura de etidio este un cancerigen, astfel încât manipularea acesteia necesită măsuri de siguranță adecvate, cum ar fi purtarea mănușilor.
- Răciți soluția de gel într-o baie de apă pentru a preveni deformarea tăvii de gel din cauza temperaturilor ridicate.
- Puneți un pieptene în soluția de gel pentru a forma godeuri de probă. Selectați piepteni potriviti pentru cantitatea de probă de ADN pe care o veți încărca. Se toarnă soluția de gel de agaroză întava cu gelși lăsați-l să se solidifice la temperatura camerei.
- Odată ce gelul s-a solidificat, îndepărtați pieptene. Dacă nu veți folosi gelul imediat, înfășurați-l într-o folie de plastic și păstrați-l la 4℃ până când este necesar.
Pregătirea și rularea gelului
Înainte de a începe electroforeza, amestecați proba de ADN cu tampon de încărcare. Tamponul de încărcare este de obicei de șase ori mai concentrat și ajută proba să se scufunde în fundul puțurilor și să urmărească mișcarea în timpul electroforezei.
Setați sursa de alimentare la tensiunea specificată.
Adăugați suficient tampon de electroforeză în rezervorul de gel pentru a acoperi suprafața gelului.Asiguraconexiunile corecte ale electrozilor.
Încărcați proba de ADN și markerii de greutate moleculară în godeurile de gel.
Porniți sursa de alimentare pentru a iniția electroforeza.
Observarea fragmentelor de ADN separate
După electroforeză, opriți sursa de alimentare și îndepărtați gelul.
Utilizați o sursă de lumină UV pentru a ilumina gelul; Fragmentele de ADN vor apărea ca benzi fluorescente portocalii.
Documentați imaginea gelului pentru a analiza fragmentele de ADN separate.
După experiment, asigurați-vă că eliminarea gelului și a tamponului de electroforeză este adecvată, urmând instrucțiunile de laborator. Purtați întotdeauna mănuși când manipulați geluri și soluții tampon care conțin bromură de etidio pentru a vă proteja împotriva expunerii la această substanță periculoasă.
Electroforeza pe gel ADN este utilizată pe scară largă în cercetarea în biologie moleculară și genetică pentru estimarea dimensiunilor moleculelor de ADN, separarea fragmentelor de ADN, detectarea mutațiilor genelor și amprentarea ADN-ului, printre alte aplicații. Este o tehnică experimentală simplă și eficientă care ajută la înțelegerea compoziției și caracteristicilor probelor de ADN.
Beijing Liuyi Biotechnology Co.Ltd, un producător profesionist care se concentrează pe produse de electroforeză de peste 50 de ani, oferă o gamă de rezervoare de electroforeză (camere/celule) pentru electroforeză în gel, cum ar fi rezervoare de electroforeză orizontale (camere/celule) pt.ADNelectroforeză pe gel și rezervoare de electroforeză verticale (camere/celule) pentru electroforeza pe gel proteic. Între timp, oferă, de asemenea, diferite tipuri de surse de alimentare pentru electroforeză, analizor de casete întunecate și transiluminator UV. Puteți alege rezervoarele de electroforeză Beijing Liuyi (camere/celule) pentru a măsura greutatea moleculară a ARN-ului și pentru a separa ARN de diferite dimensiuni pentru laboratorul dumneavoastră.
Aici vom facerecomandaun model de rezervor de electroforeză orizontală (camera/celulă).DYCP-31DN pentru a face și a rula gelul.
După rularea gelului, puteți utiliza modelul nostru de sistem de analiză și imagine a geluluiWD-9413Bpentru a observa, analiza și face poze pentru gel. Liuyi Biotech oferă, de asemenea, transiluminator UV (analizor UV) pentru a observa gelul. Avem model de transiluminator UV tip cutie neagră (analizor UV).WD-9403A,9403C,WD-9403F, model de transiluminator UV portabil (UV Analyzer).WD-9403Bși transiluminator UV de mână (analizor UV)WD-9403Epentru ca tu alegi.
Brandul Beijing Liuyi are o istorie de peste 50 de ani în China, iar compania poate oferi produse stabile și de înaltă calitate în întreaga lume. Prin ani de dezvoltare, este demn de alegerea ta!
Acum căutăm parteneri, atât rezervorul de electroforeză OEM, cât și distribuitorii sunt bineveniți.
Dacă aveți vreun plan de achiziție pentru produsele noastre, vă rugăm să nu ezitați să ne contactați. Ne puteți trimite mesaj pe e-mail[email protected]sau[email protected], sau vă rugăm să ne sunați la +86 15810650221 sau adăugați Whatsapp +86 15810650221 sau Wechat: 15810650221.
Ora postării: august-08-2023