Pregătirea unui gel de agaroză pentru electroforeză

Prepararea gelului de agaroză pentru electroforeză

Notă: purtați întotdeauna mănuși de unică folosință!

Instrucțiuni pas cu pas

Cântărirea pulberii de agaroză:use cântărește hârtie și o balanță electronică pentru a măsura 0,3 g de pulbere de agaroză (pe baza unui sistem de 30 ml).

Pregătirea tamponului TBST:pReparați 30 ml de tampon 1x TBST într-un balon Erlenmeyer de 100 ml.

Dizolvarea pulberii de agaroză:pintroduceți pulberea de agaroză în tamponul TBST și agitați bine.Pune-le înăuntrula cuptorul cu microunde și încălziți (de obicei timp de 50 de secunde, acoperit cu folie de aluminiu) până se dizolvă complet.

Răcire și adăugare de nuclează:uluați mănuși pentru a scoate amestecul din cuptorul cu microunde și lăsați-l să se răcească ușor în apă rece până când este cald (aproximativ 60°C). Se adaugă 2 µl de nuclează (inlocuitor Eb) în timp ce se agită pentru a se amesteca bine.

Pregătirea matriței cu gel:

  • Cmacră și uscațitavă cu gel și dispozitiv de turnare a geluluia rezervorului de electroforeză.
  •  Pdantelă gelultavăîn rezervorul interior și introduceți pieptene într-o poziție fixă.
  • Se amestecă soluția de gel de agaroză, se răcește la aproximativ 65°C și se toarnă cu grijă petava cu gelîndispozitiv de turnare a gelului, intindendu-l incet pana formeaza un strat uniform de gel pe placa de sticla.
  • Lăsați-l să stea la temperatura camerei până când gelul se solidifică complet.
  • Scoateți ușor pieptene pe verticală și îndepărtați banda.
  • Pune gelultavăîn rezervorul de electroforeză.

Important: Asigurați-vă că nu există bule de aer în zona dinților pieptenilor. Suprafața lichidului trebuie să fie netedă, fără ondulații.

Rularea Gelului

Încărcarea gelului

După ce gelul se solidifică, puneți-l în rezervorul de electroforeză și turnați tamponul de electroforeză până când gelul este scufundat.

Pregătirea Probelor

  • Luați markerul și tamponul de încărcare din frigider.
  • Adăugați 6µl de tampon de încărcare la probe și amestecați bine.
  • Folosind o micropipetă, încărcați încet probele în godeurile mari ale gelului (aveți grijă să nu perforați gelul și să nu distribuiți întregul volum pentru a evita bulele de aer).
  • Încărcați markerul în oricare dintre puțurile mici (rețineți poziția acestuia).

Pornirea electroforezei

  • Acoperiți rezervorul de electroforeză și începeți electroforeza imediat după încărcarea gelului.
  • Setați tensiunea la 60-100V. Probele vor migra de la electrodul negativ (negru) la electrodul pozitiv (roșu).
  • Tensiunea mai mare scurtează intervalul efectiv de separare al gelului de agaroză.
  • Opriți electroforeza atunci când colorantul albastru de bromofenol ajunge la aproximativ 1 cm de marginea inferioară a plăcii de gel.

Observarea rezultatelor

După separarea benzilor, opriți electroforeza, scoateți gelul și detectați-l și fotografiați-l direct.

Utilizați un sistem de imagistică cu gel pentru a fotografia și observa benzile (verificați dacă există benzi pentru marker sau mostre).

După ce ați obținut harta benzii de gel, găsiți markerul. Pe baza markerului, puteți determina benzile țintă!

2

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) sunt produse de electroforeză fabricate de mai bine de 50 de ani. Vă prezentăm aici sistemele noastre de electroforeză orizontală pentrugel de agarozăelectroforeză.Alegesisteme de electroforeză orizontalăde la Beijing liuyi pentru experimentul dvs. de electroforeză cu gel pentru a vă ajuta cercetarea în industria biotehnologiei.

3

Oferim diferite modele de rezervoare de electroforeză orizontale pentru turnare și rulare miciagarozăgeluri la mareagarozăgeluri

Ghid de selecție pentru unitatea de electroforeză cu gel imersat orizontal

图片1

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) s-a specializat în producția de instrumente de electroforeză de mai bine de 50 de ani, cu propria noastră echipă tehnică profesionistă și centru de cercetare și dezvoltare. Avem o linie de producție fiabilă și completă, de la proiectare la inspecție și depozit, precum și suport de marketing. Produsele noastre principale sunt celula de electroforeză (rezervor/camera), sursa de alimentare cu electroforeză, transiluminator cu LED albastru, transiluminator UV, sistem de analiză și imagine cu gel etc. De asemenea, furnizăm instrumente de laborator cum ar fi instrumentul PCR, mixerul vortex și centrifuga pentru laborator.

Dacă aveți vreun plan de achiziție pentru produsele noastre, vă rugăm să nu ezitați să ne contactați. Ne puteți trimite mesaj pe e-mail[email protected]sau[email protected], sau vă rugăm să ne sunați la +86 15810650221 sau adăugați Whatsapp +86 15810650221 sau Wechat: 15810650221.

Vă rugăm să scanați codul QR pentru a-l adăuga pe Whatsapp sau WeChat.

2


Ora postării: Aug-09-2024